液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(LLC）及液-固色譜(LSC）?，F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較，具有高效、快速、靈敏等特點(diǎn)。

 

　　液相色譜儀的用途：

　　1、在聚合物的分析中，吸附色譜一般用來(lái)分離添加劑，如偶氮染料、抗氧化劑、表面活性劑等，也可用于石油烴類(lèi)的組成分析。

　　2、用于氨基酸、蛋白質(zhì)的分析，也適合于某些無(wú)機(jī)離子（NO3-、SO42-、Cl-等無(wú)機(jī)陰離子和Na+、Ca2+、Mg2+、K+等無(wú)機(jī)陽(yáng)離子）的分離和分析，具有十分重要的作用。

　　3、適用于水溶液的體系，又適用于有機(jī)溶劑的體系。當(dāng)所用的洗脫劑為水溶液時(shí)，稱(chēng)為凝膠過(guò)濾色譜，其在生物界的應(yīng)用比較多。

 

　　液相色譜儀的操作步驟：

　　1、準(zhǔn)備：

　　①準(zhǔn)備所需流動(dòng)相，用合適的0.45濾膜過(guò)濾，超聲脫氣20min；

　?、诟鶕?jù)待測(cè)樣品的需要更換合適的色譜柱（注意方向）和定量環(huán)；

　?、叟渲茦悠返臉?biāo)準(zhǔn)溶液，用合適的0.45um濾膜過(guò)濾；

　?、軝z查儀器各部件是否連接正常，其中包括電源線、數(shù)據(jù)線、地線以及輸液管道。

 

　　2、開(kāi)機(jī)：

　　①接通電源，一次打開(kāi)檢測(cè)器、輸液泵，待檢測(cè)器自檢結(jié)束，顯示測(cè)量狀態(tài)時(shí)再打開(kāi)電腦、打印機(jī)及電腦顯示器等；

　?、诟鼡Q流動(dòng)相并排氣泡；

　?、蹖⒐苈返牟讳P鋼過(guò)濾頭放入裝有準(zhǔn)備好的流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶中；

　　④逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)泵的排空閥，約半圈，之后擰松排空閥；

　　⑤按輸送泵（purge）鍵，綠燈亮?xí)r開(kāi)始以5.0ml/min流速?zèng)_洗約2分鐘，管路無(wú)氣泡時(shí)按下（stop）鍵，重新設(shè)定流速值。

 

　　3、設(shè)計(jì)參數(shù)：

　?、倭魉僭O(shè)定

　　②波長(zhǎng)設(shè)定

　?、墼O(shè)定完成按運(yùn)行（run）按鍵

　?、苌V工作站操作：依次執(zhí)行→打開(kāi)“在線工作站”→“通道1”→“OK”→“數(shù)據(jù)采集”后進(jìn)行零點(diǎn)校正、查看基線，確定基線穩(wěn)定后關(guān)閉查看基線可以進(jìn)樣。

　　進(jìn)樣后進(jìn)行采集、預(yù)覽、查看結(jié)果、打印

 

　　4、進(jìn)樣：

　?、龠M(jìn)樣前將（A/Z）檢測(cè)器按鍵調(diào)零查看基數(shù)是否在0mv，有偏差則（零點(diǎn)校正）按鍵進(jìn)行調(diào)試

　　②用樣品清洗注射器、排除氣泡、抽取適量后將手動(dòng)進(jìn)樣閥桿調(diào)到位置，樣品注入進(jìn)樣閥后調(diào)到（Inject）位置，以此進(jìn)樣操作步驟完成，進(jìn)入在線工作站自動(dòng)采集數(shù)據(jù)流程。

 

　　5、系統(tǒng)清洗：

　　由于分析樣品時(shí)流動(dòng)相系統(tǒng)中含有緩沖鹽類(lèi)物質(zhì)，需使用10%甲醇水溶液，以1.0ml/min沖洗40分鐘后更換甲醇試劑，以同樣1.0ml/min沖洗40分鐘，停泵，關(guān)機(jī)。