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c18色譜柱在日常清洗中可分為兩種情況進行

更新時間:2020-08-10        閱讀:2703
  c18色譜柱以全覆蓋的鍵合硅膠為填料,具有優(yōu)異的穩(wěn)定性。*的單官能團化學(xué)鍵合技術(shù)可避免形成復(fù)合的c18分子層。均勻的涂層確保了固定相具有高選擇性和高效率的分離特點。

  c18色譜柱使用:
  1、首先要確認您所要分析的樣品流動相的pH范圍是否在您的柱子的pH范圍之內(nèi),以免損壞柱子硅膠!
  2、接下來就是用你做樣品的流動相去平衡柱子,如果您的流動相中含有緩沖鹽溶液,在平衡柱子之前務(wù)必要先用5%的CH3OH(C2H3N)/水去過渡10倍柱體積(150x4.6mm柱子約為30ml,250x4.6mm柱子約為45ml;下同)以上,再用帶鹽的流動相去平衡柱子足夠的時間(直到基線非常平穩(wěn)為止),之后方可進樣分析。
  3、無論您分析何種樣品,都會由于各種原因樣品中總有部分雜質(zhì),因此建議您在進樣前在柱子前端加接保護柱以保護您那昂貴的分析柱,或者用0.2um或 0.45um針頭過濾器過濾樣品后方進樣分析!
 
  c18色譜柱的清洗分兩種情況進行:
  1、如果您的樣品分析只用到一般的CH3OH,C2H3N和水的流動相(包括流動相里面加了點酸),在做完樣品后可直接用65%的C2H3N/水或者純CH3OH進行清洗10倍柱體積即可保存(如果時間有限,可視情況在儀器能承受的范圍內(nèi)加快流速******為2ml/min);
  2、如果您的樣品分析用到了含緩沖鹽或者酸或者離子對試劑的流動相,在做完樣品后的清洗必須按照下列2個步驟進行清洗柱子(不論您的柱子是否可以耐純水的極性柱子還是一般的通用性柱子):
  a、***重要的步驟——用5%的C2H3N(CH3OH)/水,清洗20倍柱體積溶劑以上,1~2ml/min(根據(jù)時間自由調(diào)節(jié)流速:如果因為時間來不及而清洗不了那么長時間,可以適當加大流速,比如1.5 or 2ml/min;LC/MS柱子應(yīng)以0.2~0.5ml/min的流速進行);
  b、65~90%的C2H3N(CH3OH)/水或者純CH3OH/C2H3N,清洗5~10倍柱體積,1~2ml/min。

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